定植苗木，可以在當年秋季或第二年春季定植，苗木生長發育差異不大。秋季只要土壤不封凍，均可定植，北方產區需要埋土防寒，葡萄苗木最好在春季定植。若采用溫室、溫床和陽畦培養的營養袋綠苗定植，可在露地葡萄萌芽后1個月左右定植。夏季綠苗定植效果也較好，成活率可達85%以上，且生長量大。采用直插建園，必須在第二年的春季萌芽前扦插。

定植方法有以下3種。

(1) 苗木定植。苗木必須經過檢疫，走法律程序；苗木須經過消毒，這也是葡萄健康栽培的必備程序。在定植前將購人的苗木浸沒在1 000倍50%辛硫磷乳油和1 500倍25%嘧菌酯懸浮劑混合液（或其他內吸性殺菌劑、殺蟲劑）12- 24小時，消滅可能帶人的病蟲害。中國農業科學院植物保護研究所葡萄病蟲害研究中心對葡萄苗木消毒采取以下措施：在43-45℃溫水中浸泡苗木2小時，再放入硫酸銅和敵敵畏配制的溶液中（100千克水中加入1千克硫酸銅，再加入80%敵敵畏150毫升，混合均勻）浸泡15分鐘，晾干后備栽種。

定植前適當修剪根系，保持根系長度在15-20厘米。定植時，將根系盡量舒展，栽植深度以原來苗床的深度為宜。單芽扦插苗適當深栽，以增加根量，提高抗旱、抗寒能力；嫁接苗則露出接口，以免接穗生根，減弱砧木作用。

(2) 綠苗定植。必須帶土臺定植，以保持根系完整。遇到光照較強、溫度較高的天氣可搭建遮陰網，以提高定植成活率。

(3) 插條定植。插條經過篩選后，經生根粉處理后即可扦插，扦插時使插條的頂芽與地面平齊，插條最好朝一個方向呈45°角斜插。